|
4. Дополнительные исследования, расширяющие представления о противопаркинсонической активности препаратов
4.1. Введение ацетилхолина с прозерином в хвостатое ядро крыс
Введение ацетилхолина (АЦХ) с ингибитором холинэстеразы прозерином в ХЯ моделирует гиперактивацию холинергической системы при ПС. Раствор, состоящий из 5 мкг АЦХ и 1 мкг прозерина, вводят в хвостатое ядро крыс. Внутримозговые инъекции осуществляются с помощью микрошприца Гамильтона, помещенного в микроманипулятор стереотаксического прибора, через специальные канюли, фиксированные на черепе животного. Фиксацию животных в стереотаксическом приборе, вживление канюль проводят под гексеналовым наркозом (150–180 мг/кг в/бр). Канюли для внутримозговых инъекций
устанавливают через специально подготовленные отверстия в черепе, стереотаксические координаты хвостатого ядра определяют по координатам стереотаксического атласа.
Эксперименты проводят через 1–2 суток после операции. Через 3–5 мин после микроинъекции АЦХ с прозерином начинается тремор — эквивалент дрожательной формы ПС, затем развиваются ригидность и олигокинезия — эквивалент акинетико-ригидной формы. Исследуемые вещества вводят за 30 мин до микроинъекции. Регистрация тремора, олигокинезии и ригидности осуществляется по методам, описанным выше.
4.2. Модель ПС, вызванного внутримозговым введением 1-метил-4-фенилпиридиния (МФП+)
Токсический эффект МФТП на нейроны черной субстанции обусловлен его конечным продуктом окисления — МФП+, который обладает высоким сродством к ДА нейронам. Введение МФП+ непосредственно в черную субстанцию (ЧС) вызывает у крыс выраженную дегенерацию ДА нейронов ЧС, снижение стриатного ДА и двигательные нарушения, характерные для ПС.
Исследования проводятся на белых беспородных крысах-самцах 9–10-месячного возраста. Животным под наркозом по координатам стереотаксического атласа в компактную зону ЧС билатерально имплантируются металлические канюли. Через 7–8 дней после операции с помощью микрошприца Гамильтона в каждое ядро ЧС через канюлю однократно вводят 10 мкг МФП+ в 2 мкл физиологического раствора. Животным контрольной группы вводят соответствующую концентрацию йодистого натрия в 2 мкл физраствора, так как 1-метил-4-фенилпиридин используется в виде йодита. Исследуемые вещества вводят на фоне развернутой картины ПС. Эффекты веществ оценивают по степени изменения олигокинезии, ригидности и тремора по методам, описанным выше. Следует отметить, что ПС регистрируется до 5–7 суток. При проведении длительного эксперимента надо учитывать, что введение МФП+ вызывает у животных адипсию и афагию, и поэтому следует применять искусственное вскармливание.
4.3. Модель ПС, создаваемого введением каиновой кислоты в ХЯ мозга
Каиновая кислота — аналог глутаминовой кислоты — вызывает блокаду ГАМК-ергических нейронов, что приводит к растормаживанию холинергических нейронов. Исследования проводятся на крысах. Животным под гексеналовым наркозом (100 мкг/кг) билатерально имплантируют металлические канюли (Д 0,22 мм) в ростральные отделы ХЯ по координатам атласа. Одновременно вживляют регистрирующи монополярные
электроды в ХЯ и сенсомоторную кору головного мозга. Через 5–7 дней после операции с помощью микроинъектора вводят 5 мкл раствора каиновой кислоты (0,1–0,15 мкг) в каждое ядро. Животным контрольной группы вводят такой же объем буферного раствора. Исследуемые вещества вводят за 30 мин до микроинъекции. Проявления ПС — ригидность, гипокинезия — развиваются быстро и сохраняются
до 5–7 дней после однократной инъекции. Воспроизводится симптомокомплекс, харатерный для акинетико-ригидной формы ПС. Эффекты веществ оценивают по степени изменения олигокинезии, ригидности и тремора по методам, описанным выше. На ЭЭГ, начиная с первых минут после введения каиновой кислоты, отмечается появление спайковых потенциалов в коре и возрастание амплитуды разрядов в ХЯ головного мозга. Периоды высокоамплитудной активности в ХЯ сменяются спайковыми потенциалами. Изменения ЭЭГ наблюдаются до 7 дней после введения каиновой кислоты.
4.4. Модель экстрапирамидных нарушений вызванных α-метил-пара-тирозином (АМПТ)
АМПТ (α-метил-пара-тирозин) подобно резерпину является эффективным агентом, истощающим катехоламины. АМПТ (иногда используемый в сочетании с резерпином) прямо тормозит тирозин гидроксилазу — фермент, ограничивающий скорость биосинтеза дофамина. Таким образом, возникающий (появляющийся, в стадии возникновения) синтез дофамина в нейронах компактной зоны черной субстанции и вентрального отдела покрышки прекращается, что приводит к истощению запасов дофамина.
4.5. Модель экстрапирамидных нарушений, вызванных липополисахаридом
Потенциальным вкладом в развитие БП и смерти клеток в базальных ганглиях может быть активация иммунного ответа. Черная субстанция богата микроглией, также как астроцитами, а прямая активация этих нейрональных клеток веществами, активирующими иммунный ответ, приводит к продукции таких агентов, как супероксиды, NO и цитокины, которые играют роль в медиации клеточной гибели близлежащих нейронов, таких как нигростриальные ДА нейроны. Одним из способов вызвать активацию иммунных ответов является инъекция веществ бактериального происхождения — липополисахаридов (ЛПС). Введение ЛПС в черную субстанцию приводит к избирательному и прогрессивному разрушению дофаминергических нейронов. ЛПС модель может быть использована также для изучения синергических эффектов активатора воспалительного пути с митохондриальным торможением, таких как ротенон.
ЛПС (strain O111:B4) вводят мышам C57BL/6 однократно в дозе 5 мг/кг внутрибрюшинно). Через 10–12 месяцев проводится оценка экстрапирамидных нарушений, которые снимаются применением L-дофы [10].
Крысам ЛПС вводят однократно или с помощью минипомпы — хронически, в черную субстанцию. Предпочтительно использовать более старых животных. На 21 день после унилатеральной инъекции ЛПС (2 мкг) в черную субстанцию крыс линии Вистар потери ДА нейрона как в стриатуме, так и в черной субстанции достигают 50% [4].
4.6. Моделирование ПС интракаудатным введением антител к дофамину
Антитела к ДА получают иммунизацией кроликов по стандартной схеме конъюгатом ДА-белок. Гамма-глобулин из сывороток контрольных и исследуемых животных очищают от антител к белку-носителю методом иммунной хроматографии. Животным под гексеналовым наркозом по координатам стереотаксического атласа в ростральные отделы ХЯ билатерально имплантируют регистрирующие нихромовые электроды. Через 5–6 дней после операции в каждое ХЯ вводят иммуноглобулины, содержащие антитела к ДА, по 200 мкг белка в объеме 5 мкл со скоростью 1 мкл/мин. Внутримозговые введения проводят с помощью микроинъектора в область, расположенную на расстоянии 1 мм от
регистрирующего электрода. Регистрацию электрической активности проводят до и после введения антител на протяжении 5–7 ч и в течение 1–2 последующих суток. Исследуемые вещества вводят на фоне развернутой картины ПС.
Введение антител к ДА приводит к выраженному снижению двигательной активности, появлению периодов «застывания», периодической акинезии, совпадающих с периодами высокоамплитудной ЭЭГ активности в ХЯ. Через 20–25 мин после введения антител к ДА у большинства животных развивается приступообразный мелко- и среднеамплитудный тремор головы, который может сохраняться до 24 ч. Возникновение тремора коррелирует с появлением средне- и высокоамплитудной пароксизмальной активности в ХЯ. Редукция олигокинезии, ригидности и тремора сопровождается нормализацией электрической активности в ХЯ.
4.7. Повреждение токами высокой частоты нигростриатного проводящего пути в вентромедиальных отделах покрышки ствола мозга у приматов
На этой модели впервые получены прямые доказательства связи повреждения компактной части черной субстанции вследствие ретроградной дегенерации ее нейронов и снижения содержания ДА в ипсилатеральном стриатуме. Разрушение у обезьян токами высокой частоты вентромедиальной тегментальной области на границе ростральных отделов моста со средним мозгом приводит к повреждению черной субстанции и снижению содержания ДА в ХЯ на стороне операции. При этом на стороне ипсилатеральной повреждению развиваются гипокинезия, ригидность и тремор конечностей.
4.8. Моделирование паркинсонического синдрома нейротоксином МФТП у приматов
Приматы являются наиболее чувствительными к нейродегенеративному эффекту МФТП. Введение МФТП проводят внутривенно, как правило, в условиях кетаминовой анестезии. Стабильный ПС развивается при повторных введениях, причем величина и кратность доз подвержены значительным индивидуальным колебаниям (от 0,75 мг/кг однократно до 2 мг/кг — 20 инъекций). У животных развивается выраженная гипокинезия, тремор конечностей при произвольных движениях, ригидность при пассивных движениях. Симптомы сохраняются на протяжении нескольких месяцев после последнего введения МФТП, выздоровления не наступает.
Другим методом создания ПС является введение МФТП в сонные артерии (0,5 мг/кг в 40 мл гепаринизированного физиологического раствора в течение 20 мин). В этом случае гипокинезия и тремор развиваются на стороне контралатеральной инфузии и затрагивают преимущественно верхнюю конечность. У некоторых животных наблюдается ипсилатеральное вращение. Симптомы гемипаркинсонизма сохраняются несколько месяцев. Эффекты исследуемых препаратов оценивают на фоне развернутойкартины ПС.
4.9. Экспериментальный ПС, вызванный введением столбнячного токсина в ХЯ крыс
Введение столбнячного токсина приводит к локальному нарушению тормозных механизмов в ростральной части обоих ХЯ и к развитию у животных ряда невропатологических синдромов, в том числе ПС, который наблюдается на поздних стадиях патологического процесса.
Микроинъекции столбнячного токсина проводят по координатам стереотаксического атласа в оба ХЯ крыс. Фоновую активность нейронов ХЯ исследуют у наркотизированных животных. Анализ распределения нейронов по частоте импульсной активности показывает, что у животных с ПС в исследуемой области увеличивается число нейронов с более высокой частотой генерации потенциалов. Эффекты исследуемых препаратов оценивают на фоне развившихся проявлений ПС.
4.10. Ротеноновая модель паркинсонического синдрома
Ротенон является высоколипофильным веществом, способным свободно проникать через ГЭБ и биологические мембраны. Механизм действия ротенона, как и механизм действия МФТП, связан с митохондриальной дыхательной цепью. Преимуществом ротенонового метода моделирования болезни Паркинсона является способность ротенона провоцировать дофаминергическую нейродегенерацию, наиболее схожую по своим симптомам и молекулярно-биологическим признакам с таковыми у болезни Паркинсона.
Олигокинезия, вызванная ротеноном, хорошо купируется препаратом L-DOPA. Для моделирования болезни Паркинсона ротенон применяется по преимуществу на клеточных структурах и в эмбриологических исследованиях. На взрослых животных, в основном на крысах, ротенон применяется значительно реже в связи с его низкой химической стабильностью в животных тканях и физиологических жидкостях. Животным ротенон вводится инфузионно, с помощью микронасосов, преимущественно внутривенно.
Также используются субкутантный и внутрибрюшинный инъекционные способы введения (Fleming et al, 2004b). У крыс инфузионное системное введение ротенона в течение недели вызывает билатеральное поражение стриатума и бледного шара, ДА нейродегенерацию в черной субстанции (с уменьшением количества нейронов на 30%). На уровне поведения действие ротенона проявляется в виде снижения количества вертикальных стоек, гипокинезии и даже в выраженной каталепсии [5]. Недостатком модели является низкая селективность действия препарата — ротенон способен поражать практически все органы животных, вызывая некроз и даже неопластические изменения, в связи с чем ряд симптомов, которые ранее относили к паркинсоноподобному действию препарата — олигокинезию, проблемы с инициацией движения, можно отнести к общему ухудшению самочувствия исследуемых животных. Другим недостатком ротенона является его низкая химическая стабильность. Для формирования экспериментального паркинсонизма требуется большой период хронического введения ротенона (от 1 недели до 3 месяцев). Так, при подкожном введении ротенон растворяют в растительном масле и вводят в дозе (2 мг/кг/день) в течение 4 недель. Высоко воспроизводимой моделью ПС у крыс (возраст 12–14 месяцев) является системное введение ротенона в дозе 2,75 или 3 мг/кг/день/7 дней внутрибрюшинно в
специально приготовленном растворе. У животных развивается брадикинезия, постуральная неусточивость и/или ригидность, которые отменяются введением апоморфином [2]. Готовят маточный раствор ротенона 50 в 100% диметилсульфоксиде (ДМСО) и разбавляемый нейтральным триглицеридом Miglyol 812 N до достижения концентрации в 2,75 или 3,0 мг/мл ротенона в 98% Miglyol 812 N и 2% ДМСО. Раствор готовится 2–3 раза в течение недели, хранится в темноте, перед введением тщательно перемешивается. Раствор вводится в расчете 1 мл на 1 кг веса животного. Поведение животных изучают в 3, 6, и 9 дни эксперимента. Используют ряд тестов для выявления экстрапирамидных нарушений, а также тест апоморфиновой вертикализации. Апоморфин вводится в дозе 1 мг/кг подкожно, через 5 мин проводят оценку вертикальной активности, а через 10 мин — постуральной неустойчивости. Также используется унилатеральное введение ротенона (12 μг в 0,5 μл димексида со скоростью 0,1 μл/мин.) в «medial forebrain bundle» по координатам (AP:+0,2; L:±1,8; DV: 8 мм) стереотаксического атласа.
Интранигральное однократное унилатеральное введение ротенона в малых дозах на сегодняшний день предлагается как одна из адекватных моделей ПС у крыс [19], которая воспроизводит длительные нейрохимические и нейропатологические изменения, схожие с изменениями при БП в нигростриатной системе. Применение данного способа введения ротенона (в дозах 3-, 6- и 12-мкг) не вызывает изменений в периферических органах на протяжении 4 недель наблюдения.
Ротенон, растворенный в ДМСО, вводят в компактную зону черной субстанции правого полушария по стереотаксическим координатам (AP: 5,0 мм; L: 2,0 мм; DV: 8,0 мм) со скоростью 0,2 мкл/мин, иглу выводят из мозговой ткани спустя 5 мин после введения.
В течение первых 72 ч после операции проводят наблюдения на наличие любой анормальной активности крыс, например, появление ротационных движений. Тест апорфиново-индуцированного вращения проводят через 2 недели после интранигрального введения ротенона еженедельно на протяжении 1,5 месяцев, а затем раз в месяц до достижения 6 месяцев, в зависимости от задач исследования. Апоморфин вводят в дозе 1,5 мг/кг и наблюдают за вращениями животного в течение 30 мин.
4.11. Модель L-дофа индуцированной дискинезии
Уже после 2–3 лет постоянного приема ДОФА-содержащих средств (ДСС) развиваются двигательные флюктуации и дискинезии более чем у 40% больных, риск появления которых увеличивается на 10% в год при продолжительной L-дофа терапии. Причинами двигатель-ных флюктуаций являются: прогрессирующая, нарастающая с течением заболевания дегенерация нигростриарных нейронов, изменение функционального состояния и чувствительности дофаминергических рецепторов, колебание уровня леводопы в плазме, связанное с приемом ДСС, нарушение способности к захвату леводопы, синтезу из леводопы дофамина и нарушение депонирования дофамина и его высвобождения в синаптическую щель [15].
Факторами риска для появления L-дофа индуцируемых дискинезий (ЛИД) являются молодой возраст начала заболевания, продолжительность лечения и дозы леводопы, тяжесть и представленность признаков БП и женский пол. Поиск препаратов для предупреждения и лечения этого серьезного осложнения является крайне актуальным.
В последние несколько десятилетий для исследования ЛИД активно используются гемипаркинсонические крысы [15]. В условиях этой модели БП крысы получают внутримозговую унилатеральную инъекцию 6-ГОДА, что вызывает ипсилатеральное разрушение ДА нейронов и вращение крыс в сторону, противоположную стороне поражения. После инъекции дофаминовых агонистов, таких как апоморфин и L-дофа наблюдается контралатеральное вращение, а в ответ на введение дофаминовых антагонистов — амфетамина — крысы вращаются в ипсилатеральном направлении. На основе данного факта построена модель дискинезии, вызванной хроническим введением L-дофа [1, 9]. Спустя 3 недели после введения 6-ГОДА крысам вводят L-дофа в терапевтической дозе 6–10 мг/кг внутрибрюшинно в течение 15 дней и бенсеразид (DL-serine 2-(2,3,4-trihydroxybenzyl) hydrazine hydrochloride) в дозе 15 мг/кг, подкожно, растворенный в физиологическом растворе с добавлением 0,1% аскорбиновой кислоты.
4.12. Оценка L-дофа индуцированной дискинезии по шкале аномальных непроизвольных движений
Шкала аномальных непроизвольных движений у крыс, вызванных ЛИД, включает стереотипные движения и контраверсивную ротацию [20]. Выделяют три типа стереотипий: дискинезия конечностей, осевая дискинезия и жевательная дискинезия. Дискинезия конечностей рассматривается как повторяющиеся миоклонические движения или дистонические положения передней конечности стороны противоположной поражению. Осевые дискинезии определяются как сгибания или осевое вращение шеи и туловища в направлении контралатеральном стороне поражения. Оролингвальная (орофациальная) дискинезия выражается в повторяющихся жевательных движениях челюсти, которые могут сопровождаться высовыванием языка. Ротационное поведение определяется как повороты или вращательные движения в направлении противоположном стороне введения 6-ГОДА. Оценка аномальных
непроизвольных движений проводится в баллах и основана на их продолжительности: 0 — отсутствие аномальных движений; 1 — редкие аномальные движения, которые занимают меньше 50% времени наблюдения; 2 — частые аномальные движения, которые занимают 50% времени наблюдения; 3 — аномальные двигательные акты, происходящие непрерывно, но прерываемые сенсорными стимулами (например, постукивание по боксу); 4 — непрерывные, непрерываемые сенсорными стимулами аномальные двигательные акты. За каждой крысой наблюдают в течение 1 мин на протяжении 140 мин через каждые 35 мин. Баллы, полученные при оценке разных видов стереотипий и ротационного дви-
жения крысы, суммируются. Вычисляется среднее значение по группе.
5. Сопутствующие нейропсихотропные эффекты противопаркинсонических
лекарственных средств, побочное действие и острая токсичность
В дополнение к данным об основной противопаркинсонической активности следует представить данные о других эффектах препарата и острой токсичности. Учитывая спектр фармакологической активности известных препаратов, близких по структуре исследуемому, определяют наличие или отсутствие седативного или активирующего эффектов, влияние на обучение и память, агрессивность и другие возможные эффекты.
Для оценки седативного или активирующего действия регистрируют поведение в открытом поле и в актометрах любого типа, используют тест залезания на сетку; изучение влияния на обучение и память можно провести в тестах пассивного и активного избегания: для изучения миорелаксантного действия используются тесты вращающегося стержня, рефлекса подтягивания на перекладине, тест бокового положения; для оценки агрессивности можно использовать провоцирующий «драку» электрический ток. Исследование дополнительных эффектов проводят в широком диапазоне доз. Острая токсичность изучается на двух видах животных, на которых изучалась основная активность, при тех же путях введения. Рассчитывается ЛД50.
6. Изучение эффектов противопаркинсонических
лекарственных средств при длительном введении и отмене
Учитывая, что лечение больных паркинсонизмом проводится длительными курсами, а также имеющиеся данные о снижении эффективности большинства известных противопаркинсонических препаратов при длительном применении, следует проводить оценку эффективности исследуемого вещества на нескольких базисных тестах при курсовом введении (не менее 1 мес.).
С целью оценки возможного синдрома отмены следует провести оценку основных показателей поведения и рефлексов животных после отмены длительного введения препарата (через 36–72 ч). Поскольку существует возможность усиления симптомов ПС на фоне резкой отмены препарата, целесообразно оценить реакцию животных по основным проявлениям ПС на основных моделях.
7. Исследование механизма действия
противопаркинсонических лекарственных средств
Представляются данные по изучению механизма действия, имеющиеся на данный момент. Рекомендуются радиолигандные исследования, изучение сдвигов нейромедиаторного баланса, особенно ДА, АЦХ, серотонина.
8. Изучение взаимодействия противопаркинсонических
лекарственных средств с другими препаратами
В связи с преобладанием заболеваемости паркинсонизмом среди людей пожилого возраста, имеющих, как правило, ряд сопутствующих заболеваний и принимающих другие препараты, рекомендуется оценить взаимодействие нового препарата с транквилизаторами, снотворными, а также с этанолом и, желательно, сердечно-сосудистыми препаратами.
9. Изучение общей фармакологической активности
противопаркинсонических лекарственных средств,
влияния на сердечно-сосудистую систему, дыхание
Наблюдение за состоянием животных осуществляют на мышах и крысах при введении препарата в широком диапазоне доз. При этом определяется повышение или снижение возбудимости, наличие судорог, гиперкинезов, изменение цвета кожных покровов, взъерошивание шерсти, птоз, стереотипия, груминг. Изучается пиннеальный, болевой, роговичный рефлексы, влияние на температуру тела, потребление воды и пищи. Влияние на ССС, дыхание и на периферические отделы нервной системы изучается на интактных или наркотизированных кошках, кроликах или крысах по влиянию на уровень
кровяного давления, ритм сердечной деятельности, дыхания, а также на реакции, вызванные введением нейромедиаторов, например, адреналина, норадреналина, ацетилхолина, серотонина.
Заключение
В заключении кратко суммируются полученные данные о спектре противопаркинсонической активности, анализируются дополнительные и побочные эффекты, представляются сведения о преимуществах нового препарата перед известными средствами сходной направленности действия. Материалы оформляются в виде научного отчета в соответствии с ГОСТ 7.32-2001 и
Приказом Минздравсоцразвития России от 23 августа 2010 г. № 708н «Об утверждени правиллабораторной практики» с предоставлением в таблицах как первичных данных по каждому веществу, так и статистически обработанных результатов. К отчету необходимо приложить аналитические паспорта или нормативные документы на референтные и тестируемые вещества.
Литература
1. Bishop C., Taylor J.L., Kuhn D.M., Eskow K.L., Park J.Y., Walker P.D. MDMA and fenfl uramine
reduce L-DOPA-induced dyskinesia via indirect 5-HT1A receptor stimulation. 2006. Eur J Neurosci
23: 2669–2676.
2. Cannon J.R., Tapias V.M., Na H.M., Honick A.S., Drolet R.E., Greenamyre J.T. A highly reproducible
rotenone model of Parkinson’s disease. Neurobiol Dis. 2009. 34(2): 279–290.
3. Colpaert F.C. Pharmacological characteristics of tremor, rigidity and hypokinesia induced by
reserpine in rat. Neuropharmacology, 1987; 26(9): 1431–40.
4. Dutta G., Zhang P., Liu B.. The Lipopolysaccharide Parkinson’s disease animal model: mechanistic
studies and drug discovery. Fundam Clin Pharmacol. 2008. 22(5): 453–464.
5. Fleming S.M., Salcedo J., Fernagut P.O., Rockenstein E., Masliah E., Levine M.S., Chesselet
M.F. Early and Progressive Sensorimotor Anomalies in Mice Overexpressing Wild-Type Human
α-Synuclein. J. Neurosci. 2004а. 24: 9434–9440.
6. Fleming S.M., Zhu C., Fernagut P.O., Mehta A., Dicarlo C.D., Seaman R.L., Chesselet M.F.
Behavioral and immunohistochemical eff ects of chronic intravenous and subcutaneous infusions of
varying doses of rotenone. Exp Neurol. 2004b. 187(2):418–29.
7. Heikkila R.E., Cabbat F.S., Manzino L., Duvoisin R.C. Eff ects of 1-methyl-4-phenyl-1,2,5,6-
tetrahydropyridine on neostriatal dopamine in mice. Neuropharmacology, 1984; 23(6): 711–3.
8. Kirik D., Rosenblad C., Bjorklund A. Preservation of a functional nigrostriatal dopamine pathway by
GDNF in the intrastriatal 6-OHDA lesion model depends on the site of administration of the trophic
factor. Eur J Neurosci, Nov 2000; 12(11): 3871–82.
9. Lindgren H.S., Rylander D., Ohlin K.E., Lundblad M., Cenci M.A. The «motor complication
syndrome» in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with L-DOPA: relation to dose and
route of administration. 2007.Behav Brain Res 177:150–159.
10. Liu Y., Qin L., Wilson B., Wu X., Qian L., Granholm A.-C., Crews F.T., Honga J.-S. Endotoxin induces
a delayed loss of TH-IR neurons in substantia nigra and motor behavioral defi cits. Neurotoxicology.
2008. 29(5): 864–870.
11. Meredith G.E., Sonsalla P., Chesselet M.-F. Animal Models of Parkinson's Disease Progression. Acta
Neuropathol. 2008; 115(4): 385–398.
12. Morpurgo C. Infl uence of phenothiazine derivatives on the accumulation of brain amines.
13. Ogawa №., Hirose Y., Ohara S., Ono T., Watanabe Y. A simple quantitative bradykinesia test in
MPTP-treated mice. Res Commun Chem Pathol Pharmacol, 1985; 50(3): 435–41.
14. Putterman D.B., Munhall A.C., Kozell L.B., Belknap J.K., Johnson S.W.. Evaluation of levodopa dose
and magnitude of dopamine depletion as risk factors for levodopa-induced dyskinesia in a rat model
of Parkinson’s Disease’s. The journal of pharmacology and experimental therapeutics. 2007. Vol. 323,
№ 1: 277–284.
15. Sanberg P.R., Bunsey M.D., Giordano M., and Norman A.B. The catalepsy test: its ups and downs.
Behav Neurosci, 1988; 102(5): 748–59.
16. Sonsalla P.K., Heikkila R.E. The infl uence of dose and dosing interval on MPTP-induced
dopaminergic neurotoxicity in mice. Eur J Pharmacol. 1986; 129(3): 339–45.
17. Tillerson J.L., Miller G.W. Grid performance test to measure behavioral impairment in the MPTPtreated-
mouse model of parkinsonism. J Neurosci Methods. 2003; 123(2): 189–200.
18. Xiong №., Huang J., Zhang Z., Xiong J., Liu X., Jia M., Wang F., Chen Ch., Cao X., Liang Z., Sun S.
Stereotaxical Infusion of Rotenone: A Reliable Rodent Model for Parkinson's Disease. PLoS One.
2009; 4(11): e7878.
19. Winkler C., Kirik D., Bjorklund A., Cenci M.A. L-DOPA-induced dyskinesia in the intrastriatal
6-hydroxydopamine model of parkinson’s disease: relation to motor and cellular parameters of
nigrostriatal function. Neurobiol Dis, 2002; 10(2): 165–86.
| 
